2025-12-05 09:17:35來源：鼎泰集團TriApex 瀏覽量：189
科學的溫度，常藏于那些看似冰冷的數(shù)字之中。ADC 的發(fā)展讓我們明白，真正的創(chuàng)新不止是安全性與療效，也在于對復雜的敬畏。每一次偶聯(lián)與純化，都是科學與秩序的對白、期待與克制的平衡。 全文共：8304 字 18 圖 預計閱讀時長：25 分鐘 近年來，隨著多款 ADC 獲批上市、研發(fā)管線持續(xù)拓展和重磅 BD 交易觸發(fā)的迭代創(chuàng)新，行業(yè)對 ADC 的認知已不再局限于“能否成藥”，更進一步強調(diào)“如何實現(xiàn)持續(xù)、可控地成藥“，這標志著 ADC 藥物研發(fā)正進入一個需要更成熟質(zhì)量體系支撐的“深水區(qū)”。 ADC 結(jié)構(gòu)的多元特性在賦予其“靶向遞毒”能力的同時，也帶來了 CMC 層面的復雜挑戰(zhàn)。在眾多質(zhì)量風險因素中，小分子相關(guān)雜質(zhì)因其來源多樣、結(jié)構(gòu)差異大，且部分具有潛在藥理活性或化學反應性，可能引發(fā)非預期的藥理、毒理或免疫反應，成為控制策略的關(guān)鍵之一。然而，當前基于傳統(tǒng)小分子藥物建立的雜質(zhì)控制框架（如 ICH Q3 系列）并未充分考慮 ADC 的復雜結(jié)構(gòu)和生產(chǎn)工藝，導致企業(yè)在雜質(zhì)識別、限度界定與管控策略上缺乏明確指南，更多依賴個案數(shù)據(jù)的積累，為 NDA 申報帶來了不確定性。很多 ADC 研發(fā)企業(yè)也時常困惑于如何對小分子相關(guān)雜質(zhì)進行有效的管控。 在這一背景下，鼎泰團隊系統(tǒng)梳理了相關(guān)文獻與行業(yè)共識文件，旨在厘清 ADC 藥物小分子相關(guān)雜質(zhì)的控制邏輯和限度設(shè)定依據(jù)，希望為同行在推進 NDA 申報與商業(yè)化過程中，提供兼具科學性與監(jiān)管適應性的質(zhì)控策略參考。 聲明 本文僅為行業(yè)科普及學術(shù)研究用途，不構(gòu)成對任何藥品、醫(yī)療器械或相關(guān)產(chǎn)品的推廣、推薦或商業(yè)宣傳。文中提及內(nèi)容均基于公開資料，不涉及具體產(chǎn)品功效暗示或商業(yè)利益關(guān)聯(lián)；若與特定品牌或產(chǎn)品名稱有所提及，均為事實描述，不代表任何商業(yè)導向。請讀者勿將相關(guān)信息作為醫(yī)療建議或購買依據(jù)，任何診療或用藥請遵從專業(yè)醫(yī)師意見。 ★ 文章導覽 ★ 01 ADC 的偶聯(lián)化學和雜質(zhì)來源 02 ADC 小分子雜質(zhì)的分類和風險等級 03 ADC 小分子雜質(zhì)的控制策略 04 工藝變更可比性研究 05 超出閾值的 ADC 小分子雜質(zhì)限度設(shè)定 06 結(jié)語 ADC 的偶聯(lián)化學和雜質(zhì)來源 ADC 藥物的制備主要可分為兩大類： “一步法”，通過化學合成將有效載荷與連接子結(jié)合形成載荷-連接子中間體，隨后再將其與抗體進行偶聯(lián)； “兩步法”，先在抗體上接入連接子，再偶聯(lián)有效載荷[1]。 根據(jù)偶聯(lián)位點的選擇性不同，ADC 的偶聯(lián)方式又可進一步分為位點非特異性偶聯(lián)和位點特異性偶聯(lián)兩大類： ■ 位點非特異性偶聯(lián) 目前多數(shù)已上市 ADC 藥物采用該策略，主要依賴抗體分子上溶劑可接觸的賴氨酸（Lys）和鏈間半胱氨酸（Cys）殘基進行偶聯(lián)[2]。1 個抗體分子通常含有約 80-90 個溶劑可接觸的賴氨酸和 8 個鏈間半胱氨酸，盡管多位點反應可能導致偶聯(lián)產(chǎn)物在 DAR 值上存在異質(zhì)性，但通過嚴格控制反應與生產(chǎn)條件，仍可保證不同批次間的一致性，滿足大規(guī)模生產(chǎn)需求[4]。 賴氨酸偶聯(lián)：利用抗體表面溶劑可接近的 ε-氨基與帶電親性的載荷-連接子反應，形成穩(wěn)定的共價連接； 半胱氨酸偶聯(lián)：通過部分還原抗體鏈間二硫鍵，生成活性巰基，通過巰基特異性與馬來酰亞胺連接子進行偶聯(lián)。 圖1. 已上市 ADC 藥物的基本信息匯總(截至2024年12月31日）[2] 盡管部分連接子對特定氨基酸具有高特異性，競爭性副反應仍然難以完全避免。例如，在利用 SMCC 連接子進行賴氨酸定向偶聯(lián)時，其 NHS 酯官能團可能發(fā)生競爭性水解，阻礙連接子和抗體的連接；同時，NHS 酯還可能與非目標絲氨酸、蘇氨酸和絡氨酸生成穩(wěn)定性較差的乙酰化偶聯(lián)物[3]。為實現(xiàn)偶聯(lián)位點可控、產(chǎn)品均質(zhì)化、優(yōu)化安全性，優(yōu)化治療窗口，位點特異性偶聯(lián)逐漸成為發(fā)展方向之一。 ■ 位點特異性偶聯(lián) 目前，該技術(shù)已歷經(jīng)多年發(fā)展，但多數(shù)應用方案尚未實現(xiàn)規(guī)?；涞?，本文僅對部分技術(shù)進行了匯總分析[2][5]。相較于傳統(tǒng)方法，位點特異性偶聯(lián)技術(shù)通常涉及更為復雜的合成路線、更多樣的試劑與起始物料，因此對其 CMC 生產(chǎn)工藝也提出了更為嚴苛的要求。 圖2. 位點特異性偶聯(lián)方式部分匯總 ADC 的合成工藝具有多步驟、多物料、多模塊的特點，涵蓋載荷-連接子合成、抗體表達及偶聯(lián)反應等關(guān)鍵步驟，最終得到原料藥（DS）和制劑（DP）。這一特殊工藝決定了其雜質(zhì)譜的潛在復雜程度——在抗體、連接子、載荷等物料的生產(chǎn)和偶聯(lián)反應，以及 DS、DP 的儲存環(huán)節(jié)中，多種化學試劑與反應都有可能成為雜質(zhì)的來源。鑒于此，ADC 的 CMC 開發(fā)策略通常需要設(shè)置多個質(zhì)量控制節(jié)點，并通過分階段評估，管控中間體、DS 及 DP 的關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQA）。 圖3. ADC 生產(chǎn)合成工藝路徑示例[6] ADC 小分子雜質(zhì)的分類和風險等級 ADC 在生產(chǎn)過程中通常會產(chǎn)生復雜的雜質(zhì)譜，這些雜質(zhì)可根據(jù)來源和分子量大致劃分為抗體相關(guān)雜質(zhì)和小分子雜質(zhì)兩大類。 其中，抗體部分的相關(guān)質(zhì)量控制已有較完善的監(jiān)管指導；而小分子方面，目前尚缺乏專門針對 ADC 的國際性技術(shù)指南，監(jiān)管要求要求尚不明確?，F(xiàn)階段，通常綜合參照 ICH Q3A/Q3B（雜質(zhì)識別及限度）、Q3C/Q3D（溶劑與元素雜質(zhì)），以及 M7（基因毒性雜質(zhì)）等指導原則進行質(zhì)量控制。由于 ADC 同時具備化藥和生物制品的雙重屬性，CMC 板塊控制思路往往需要兼顧兩類藥物的監(jiān)管邏輯?？紤]到目前多數(shù) ADC 用于治療晚期腫瘤，ICH S9 與 M7 均指出，對于此類嚴重或威脅生命的疾病，可根據(jù)風險-獲益原則適當放寬雜質(zhì)控制要求，如果能夠科學論證安全性風險，那么即便在控制要求上存在一定偏離，從監(jiān)管角度看也是合理且可接受的。 2.1 基于來源的小分子雜質(zhì)分類 根據(jù) 2018 年國際藥物開發(fā)創(chuàng)新與質(zhì)量聯(lián)盟（IQ）下屬的雜質(zhì)工作組（WG）發(fā)布的白皮書，將 ADC 小分子雜質(zhì)從來源角度分為了三類[7]： 1) 來源于載荷-連接子合成階段的雜質(zhì)：包括反應中間體、未反應原料、活性基團殘留（如馬來酰亞胺、NHS酯）及其衍生物等； 2) 偶聯(lián)反應過程中形成的雜質(zhì)：為確保偶聯(lián)反應完全，生產(chǎn)工藝中常使用過量的載荷-連接子中間體，其高反應活性基團可能會與抗體或體系中游離的巰基、氨基發(fā)生非特異性反應，生成新的雜質(zhì)。為了終止殘余反應、避免雜質(zhì)生成，通常會在偶聯(lián)結(jié)束后加入淬滅劑（如 L-半胱氨酸、NAC 等），與殘余活性基團生成穩(wěn)定的可過濾淬滅產(chǎn)物，而此過程本身也可能引入與淬滅副產(chǎn)物相關(guān)的新雜質(zhì)[8]。此外，已有研究指出：馬來酰亞胺與半胱氨酸形成的硫醚鍵可通過 Retro-Michael 反應發(fā)生解偶聯(lián)，導致載荷與其他游離硫醇結(jié)合；帶有硫代烷?；虻?NHS 酯在特定氨基酸位點上可能發(fā)生非預期的琥珀酰亞胺開環(huán)，形成 NHS 類副產(chǎn)物，可進一步降解，引發(fā)小分子部分脫落及潛在免疫原性風險[9][10]。 圖 4. （A）馬來酰亞胺、（B）NHS 酯在偶聯(lián)過程中可能發(fā)生的副反應產(chǎn)物[9][10] 圖 5. 在純化工藝中使用淬滅劑能夠清除游離載荷-連接子中間體相關(guān)雜質(zhì)[8] 3) DS 和 DP 儲存降解過程中與穩(wěn)定性相關(guān)的雜質(zhì)：如載荷脫落或連接子斷裂后形成的降解產(chǎn)物。 2.2 基于可偶聯(lián)性的小分子雜質(zhì)分類 根據(jù)是否能與抗體發(fā)生偶聯(lián)反應，可將小分子雜質(zhì)進一步劃分為可偶聯(lián)與不可偶聯(lián)兩類。 大多數(shù)雜質(zhì)屬于不可偶聯(lián)類，通?？稍谙掠渭兓^程中通過超濾/洗濾（UF/DF）將其控制在低于引發(fā)安全性風險的范圍內(nèi)。針對不具有細胞毒性相關(guān)結(jié)構(gòu)（例如載荷類結(jié)構(gòu)）的雜質(zhì)，其潛在安全性風險更低。 對于可偶聯(lián)雜質(zhì)，由于常規(guī) UF/DF 等物理純化方法難以有效去除，應將質(zhì)量控制中的關(guān)鍵節(jié)點前置于載荷-連接子中間體的合成階段，并在最終放行階段予以關(guān)注。后續(xù)文獻也有提到通過色譜等方法進行純化，該內(nèi)容將在下一部分進行討論。 2.3 小分子雜質(zhì)的風險控制邏輯 針對小分子雜質(zhì)的風險評估，2018 年 IQ 聯(lián)盟白皮書建議從三個核心維度進行考量：純化能力、毒理學活性和暴露水平。這一思路與 2023 年歐洲制藥行業(yè)協(xié)會聯(lián)合會（EFPIA）發(fā)布白皮書中的主張不謀而合 —— 均強調(diào)應充分理解產(chǎn)品屬性、中間體特征及整體工藝，依據(jù)科學風險評估結(jié)果對控制策略與放行標準進行適應性調(diào)整。在資源投入和監(jiān)管關(guān)注點上，聚焦真正具有潛在風險的環(huán)節(jié)，避免開展不必要的研究或過度控制[6]。 IQ 聯(lián)盟下屬工作組在調(diào)研當前行業(yè)實踐時也發(fā)現(xiàn)，ADC 研發(fā)企業(yè)對載荷-連接子相關(guān)雜質(zhì)的控制普遍遵循以上原則。根據(jù)雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)特征，臨床研發(fā)階段限度設(shè)定的嚴格程度大致呈現(xiàn)以下趨勢： 手性雜質(zhì)>未具體定義的雜質(zhì)>已指定但結(jié)構(gòu)未確認的雜質(zhì)>已指定且結(jié)構(gòu)明確的雜質(zhì)。 該趨勢體現(xiàn)了業(yè)界通過科學認知優(yōu)化質(zhì)量控制策略的共識，也為后續(xù)制定可操作的雜質(zhì)控制方案提供了實踐基礎(chǔ)[1]。 圖 6. 2018 年 IQ 聯(lián)盟發(fā)布相關(guān)白皮書 圖 7. 2023 年 EFPIA 聯(lián)會發(fā)布相關(guān)白皮書 ADC 小分子雜質(zhì)的控制策略 ADC 小分子雜質(zhì)的控制策略的核心在于，識別雜質(zhì)的可偶聯(lián)性及其在生產(chǎn)體系中的可清除性。 3.1 不可偶聯(lián)雜質(zhì)的清除策略 對于多數(shù)不可偶聯(lián)雜質(zhì)而言，由于其分子量遠小于 ADC 以及純化用的超濾膜孔徑，通常可在生產(chǎn)工藝的下游階段通過 UF/DF 有效去除。 根據(jù) 2023 年 IQ 聯(lián)盟下屬工作組的行業(yè)調(diào)研結(jié)果，所有受訪企業(yè)均采用 UF/DF 進行純化，其中 73% 的企業(yè)將其作為生產(chǎn)工藝中唯一的純化方法，且多數(shù)報告采用才方法足以將不可偶聯(lián)雜質(zhì)清除至安全閾值以下[12]。 然而，在某些情況下，例如，當載荷-連接子本身具有較強疏水性時，這類分子可能在過濾緩沖液中形成膠束結(jié)構(gòu)，使得部分雜質(zhì)分子量接近 ADC 本身，進而影響清除效率。因此，除 UF/DF 外，純化過程中常常需要根據(jù)具體情況，開發(fā)單元式操作，通過調(diào)整緩沖液組成、pH 值或膜孔徑等操作參數(shù)，或引入色譜步驟進行進一步純化以提升雜質(zhì)去除效果，幫助洗脫[8][11]。 3.2 可偶聯(lián)雜質(zhì)的間接控制之道 可偶聯(lián)雜質(zhì)的控制更具挑戰(zhàn)性。這類雜質(zhì)若在偶聯(lián)反應中與抗體反應生成 ADC 結(jié)構(gòu)相似物，常規(guī)純化步驟可能難以將其完全區(qū)分。 由于在 DS 和 DP 中直接檢測此類雜質(zhì)的難度較高，當前行業(yè)的共識是將控制節(jié)點前移至載荷-連接子中間體階段，通過對中間體中雜質(zhì)水平的監(jiān)測和限度設(shè)定，間接確保成品 ADC 中的可偶聯(lián)雜質(zhì)處于可接受范圍[6]。部分企業(yè)也會在下游通過色譜或多步純化對成品進行補充清除，以提高工藝穩(wěn)健性[12]。需要指出的是，偶聯(lián)反應中生成的過程雜質(zhì)含量可能高于中間體中的既有雜質(zhì)。此類情況下，白皮書建議在開發(fā)階段通過實驗證據(jù)驗證純化步驟對這些雜質(zhì)的清除能力，而非在 DS 質(zhì)量標準中逐項規(guī)定限度[7]。 3.3 科學驅(qū)動的動態(tài)管控 目前，ADC 純化策略在業(yè)界內(nèi)尚未形成標準化方案，不同企業(yè)通常基于產(chǎn)品特性、載荷性質(zhì)及項目階段定制差異化控制策略。這一方面源于各產(chǎn)品在穩(wěn)定性和雜質(zhì)譜上存在差異，另一方面也與 ADC 項目在部分企業(yè)研發(fā)管線中的占比較低、標準化投入產(chǎn)出不匹配相關(guān)。 行業(yè)普遍的趨勢是提倡在工藝開發(fā)階段開展 Fate-and-Purge 研究，通過追蹤各類雜質(zhì)的生成和去除路徑，評估純化單元操作的清除效率，依據(jù)去除難易程度對雜質(zhì)進行風險分級，以此指導工藝優(yōu)化與控制策略的設(shè)計。多數(shù)企業(yè)傾向于優(yōu)先研究含量最高的雜質(zhì)，其次為可偶聯(lián)雜質(zhì)，最后為不可偶聯(lián)雜質(zhì)。通過驗證純化工藝的清除能力，而非單純依賴于 ICH 小分子指南限度，以在確保 DS 和 DP 質(zhì)量可控的前提下，為 ADC 工藝提供更高的靈活性與科學合理性[7]。 此外，對于 DS 和 DP 中與產(chǎn)品穩(wěn)定性相關(guān)的降解雜質(zhì)，可在開發(fā)階段基于穩(wěn)定性數(shù)據(jù)進行充分評估，若研究結(jié)果表明其在儲存條件下可控，可在后續(xù)質(zhì)量標準中適當調(diào)整檢測頻率[6]。 總體而言，當前 ADC 小分子雜質(zhì)的控制策略趨向于以科學風險評估為基礎(chǔ)的策略導向。 圖 8. 純化過程中按雜質(zhì)去除難度進行定性分級以制定有效的控制策略[12] 工藝變更可比性研究 ADC 的合成工藝在產(chǎn)品開發(fā)過程中通常會隨著研發(fā)推進不斷優(yōu)化。 早期建立的工藝路線盡管能夠滿足臨床前和早期臨床階段的供應需求，但在工業(yè)化放大時，往往需要針對可拓展性、穩(wěn)定性、一致性等方向進一步優(yōu)化，以形成具備商業(yè)化可行性的最終工藝。然而，工藝變更可能引入新的小分子雜質(zhì)，或改變原有雜質(zhì)譜。因此在監(jiān)管層面上，“原工藝”與“新工藝”之間的可比性評估成為 CMC 開發(fā)的重點之一。EFPIA 白皮書指出： 對于載荷、連接子、載荷-連接子中間體的工藝變更：現(xiàn)有分析手段通常足以檢測出可能對下游工藝產(chǎn)生影響的差異，因此雜質(zhì)評估應遵循科學合理的風險導向原則[6]。若中間體生產(chǎn)階段已對雜質(zhì)實施充分控制，通常無需在終產(chǎn)品中重復設(shè)限。若分析結(jié)果表明變更前后中間體的雜質(zhì)譜存在顯著差異，建議通過風險評估判斷該差異是否可能影響最制劑的安全性和有效性，而不應機械套用 DS 或 DP 階段的質(zhì)量控制限度。 對于偶聯(lián)及 DS 相關(guān)的工藝變更：通常建議在 DS 層面開展風險評估和可比性研究，證明變更前后在純度、雜質(zhì)、穩(wěn)定性和安全性方面的一致性。若變更涉及偶聯(lián)緩沖體系、制劑處方、生產(chǎn)規(guī)?；驁龅氐汝P(guān)鍵參數(shù)，需額外通過實驗確認影響。 對于可能影響制劑屬性的變更：若 ADC 制劑由冷凍液體改為凍干粉針，或配處方 pH 值、輔料含量發(fā)生變化，可能影響制劑穩(wěn)定性。由于制劑穩(wěn)定性無法直接反映原料藥的穩(wěn)定性，此時需同時進行 DS 與 DP 的可比性研究，以評估其對制劑純度、活性及穩(wěn)定性的影響 —— 評估邏輯與其他大分子藥物一致。 同時，ADC 研發(fā)進程中的可比性研究，伴隨著產(chǎn)品生命周期的演進而逐步深化與擴展。不同階段的研究重點與證據(jù)要求，具有鮮明的層級化與遞進性特征： 早期階段（GLP毒理批次 vs GMP臨床批次） 通常聚焦于安全性相關(guān)質(zhì)量屬性的評估，如雜質(zhì)譜、DAR 值與效價。GMP 批次的質(zhì)量屬性應與 GLP 批次相當或更優(yōu)，除非存在顯著差異，一般無需額外開展穩(wěn)定性對比研究。 后期階段（臨床工藝 vs 關(guān)鍵性工藝） 工藝變更的可比性研究則需要擴展至安全性、有效性、質(zhì)量和穩(wěn)定性等關(guān)鍵質(zhì)量屬性，確保新工藝與既有工藝可比或更優(yōu)。隨著更多 ADC 項目被納入突破性療法（BTD），開發(fā)進程的加速使得上市后工藝變更的風險日益凸顯。目前，針對這類變更尚缺乏成體系的監(jiān)管指南，行業(yè)實踐與共識尚在逐步形成之中。 圖 9. 載荷-連接子中間體生產(chǎn)工藝變更可比性研究決策樹[6] 超出閾值的 ADC 小分子雜質(zhì)限度界定（Qualification） 基于前述討論，建立合理的 ADC 小分子雜質(zhì)量化評估限度至關(guān)重要。 ■ 行業(yè)觀點 1) IQ 聯(lián)盟白皮書（2018） 在這一背景下，IQ 聯(lián)盟于 2018 年發(fā)布的白皮書提出了一套較為合理的量化思路，其核心在于將雜質(zhì)在載荷-連接子中間體中的比例換算為患者的實際暴露量，從而與 ICH Q3A、Q3B 的限度標準進行對照評估[7]。該方法論建立于四個基本假設(shè)： ADC 僅針對癌癥治療； 小分子載荷在高劑量下可能對患者產(chǎn)生毒性； 在最極端情形下，含有載荷結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)被視為具有與載荷相似的毒性； 在1 mg/天的暴露量下，載荷本身不具有藥理學活性或毒性。 A case example： 以典型 ADC 分子為例（分子量為 160000 Da，DAR=4），小分子載荷占總質(zhì)量比僅約 5%，這意味著在偶聯(lián)反應中，載荷-連接子及其相關(guān)雜質(zhì)會經(jīng)歷約 1:20 稀釋。假設(shè)中間體中存在 3 wt% 的小分子雜質(zhì)（分子量約為 2000 Da），則在最終 ADC 產(chǎn)品中對應約為 0.15 wt%。若按每次給藥 50 mg、每 21 天一次計算，患者每次暴露量約為 75 μg，日暴露量約為 3.6 μg。根據(jù) ICH Q3A，0.15 wt% 已達到需毒理學界定的含量閾值，但按照 ICH Q3B，3.6 μg 的日平均暴露量遠低于 200 μg/day 總?cè)諗z入量閾值（圖11）。如果嚴格遵守 0.15 wt% 的限度，雜質(zhì)暴露量將低于 ICH M7 對致突變雜質(zhì)的每日允許攝入量上限。 圖 10. ICH Q3A 有關(guān)原料藥中雜質(zhì)限度閾值設(shè)定 圖 11. ICH Q3B 有關(guān)制劑雜質(zhì)限度閾值設(shè)定 圖 12. ICH M7(R2) 有關(guān)單個致突變雜質(zhì)限度閾值設(shè)定 在短期治療、高獲益預期的場景下，除非雜質(zhì)屬于“異常高效”類別（即在 0.10% 水平即可能產(chǎn)生毒性或藥理作用），否則這種限制顯得過于嚴苛，且與 ICH S9 指南存在矛盾。事實上，ADC 生產(chǎn)工藝普遍能將載荷-連接子中間體的單個雜質(zhì)控制在 3% 以下，實際暴露水平更低，通常無需單獨進行毒理學確認。 對于儲存穩(wěn)定性相關(guān)的降解雜質(zhì)，白皮書建議采用保守估計，即假設(shè)所有載荷均從抗體上脫落，且脫落產(chǎn)物與原載荷具有相似毒性，計算所得的最大潛在游離載荷及其衍生物仍低于 ICH Q3A、Q3B 要求，說明實際風險應更為有限。 圖 13. FDA 已獲批 ADC 產(chǎn)品載荷、連接子分子量信息匯總 2) 關(guān)于小分子雜質(zhì)定量閾值的立場文件 —— 期刊預校樣（2025） 與此同時，在 IQ 聯(lián)盟的支持下，2025 年一組行業(yè)/學術(shù)專家發(fā)布了關(guān)于載荷-連接子中間體中有機小分子雜質(zhì)定量閾值的立場文件（期刊預校樣），觀點匯總?cè)缦拢?/span> 圖 14. Chahrour et al 2025 年發(fā)布立場文件（期刊預校樣）[14] 可偶聯(lián)雜質(zhì)：量化閾值的論證 文章明確提出了可偶聯(lián)有機雜質(zhì)限度界定量化的數(shù)值從指導原則推薦的 0.15 wt% 提高到 1 wt%[14]，主要基于以下論證： 基于大量臨床數(shù)據(jù)積累，多數(shù)小分子和 ADC 藥物的單次給藥最高劑量具有可比性（以 600 mg 計），換算得到載荷-連接子中間體中 1 wt% 的雜質(zhì)帶來的摩爾暴露量極低，僅相當于小分子原料藥中 0.01 wt% 雜質(zhì)的暴露水平； ADC 的給藥頻率（通常 2-3 周）低于小分子藥物，載荷在體內(nèi)緩慢降解釋放，體內(nèi) Cmax 明顯低于等量直接給藥的小分子藥物； 依據(jù) ICH M7 標準，1.0 wt% 雜質(zhì)需積累 12 年才可能達到短于終生（LTL）治療的閾值，而實際 ADC 治療期通常不超過 5 年； 使用相同載荷的 ADC 往往表現(xiàn)出相似的最大耐受劑量（MTD），以兩類主流載荷 Auristatin 和 Camptothecin 分析，在最保守假設(shè)下，1 wt% 可偶聯(lián)雜質(zhì)暴露量仍低于臨床 MTD 4-10 倍，安全裕度充分。 圖 15. 單次給藥最高劑量下的暴露量計算[14] 不可偶聯(lián)雜質(zhì)：從質(zhì)量占比到患者暴露的量化路徑 和現(xiàn)有行業(yè)共識保持基本一致，文章主張根據(jù)工藝去除能力（Purge Factor, PF）、產(chǎn)品特異性生產(chǎn)常數(shù)（H），將載荷-連接子中間體中雜質(zhì)的質(zhì)量占比（wt%）轉(zhuǎn)化為患者的實際暴露量，從而建立更具臨床相關(guān)性的風險評估基礎(chǔ)。同時，建議將 Fate-and-Purge 研究作為重要的風險緩釋工具，在雜質(zhì)清除能力有限時，用于證明其已在工藝中被充分去除，進而避免不必要的毒理學界定。 基于決策樹的科學評估框架 文章還提出了一套決策流程：當雜質(zhì)含量超過 1.0 wt% 的常規(guī)標準時，允許企業(yè)基于對下游化學反應的理解，制定特定規(guī)范來判斷是否需進行毒理學評估。我們期待該立場文件的正式發(fā)布，相信它將為 ADC 領(lǐng)域的小分子雜質(zhì)控制提供新的思路與有益借鑒。 圖 16. 有關(guān)確定載荷-連接子中間體雜質(zhì)適當限度的決策樹[14] ■ 案例分析 目前，根據(jù)已上市的 15 個 ADC 藥物的審評報告，監(jiān)管披露的 ADC 小分子雜質(zhì)限度信息仍較有限。 從 2025 年獲批的 Telisotuzumab vedotin-tllv FDA 審評報告中可窺見監(jiān)管態(tài)度：綜合考量給藥頻率低于傳統(tǒng)小分子藥物、雜質(zhì)暴露量遠低于 ICH Q3A 界定閾值、雜質(zhì)結(jié)構(gòu)與載荷 MMAE 相似，以及適應癥為晚期癌癥等因素，F(xiàn)DA 認為該雜質(zhì)不構(gòu)成額外安全風險。同時，借助行業(yè)調(diào)研可見，業(yè)界普遍也在采用基于風險與暴露量的限度制定邏輯[1]。多數(shù)企業(yè)在原料及載荷-連接子層面的雜質(zhì)限度通常高于 ICH Q3A/B 要求的 0.15%。 圖 17. Telisotuzumab vedotin-tllv FDA 審評報告非臨床部分 圖 18. 臨床開發(fā)階段原料與載荷-連接體中雜質(zhì)的指定標準[1] 三者邏輯的吻合也進一步說明，小分子雜質(zhì)在 ADC 中的相對暴露量極低，其潛在安全性風險總體較小。因此，在限度制定時，更重要的是通過工藝驗證和暴露水平計算，科學論證雜質(zhì)處于可接受風險范圍。合理的控制策略應結(jié)合載荷-連接子中間體階段的雜質(zhì)控制、偶聯(lián)后純化步驟的清除驗證及穩(wěn)定性研究結(jié)果，形成一個貫穿全工藝、以風險為基礎(chǔ)的限度設(shè)定體系。 結(jié)語 總體來看，ADC 小分子雜質(zhì)的來源廣泛且復雜，涵蓋從載荷、連接子及載荷-連接子中間體，到偶聯(lián)反應過程，再到儲存與運輸?shù)榷鄠€環(huán)節(jié)。正是因為這種復雜性，ADC 的雜質(zhì)控制明顯區(qū)別于單一抗體或小分子藥物，控制策略應建立在深入的工藝理解、完善的風險評估以及充分的數(shù)據(jù)支撐之上。 在監(jiān)管和行業(yè)實踐上，雖然尚無統(tǒng)一的科學指南，但已基本形成共識：認可“基于科學依據(jù)與風險評估”（Scientifically justified and risk-based）的論證邏輯，以暴露量評估、Fate-and-Purge 研究及工藝可控性作為限度制定的主要依據(jù)之一。因此，在開發(fā)過程中積極與監(jiān)管機構(gòu)溝通，通常具有良性意義?；趯Ξa(chǎn)品和工藝的深入表征，提出科學合理的、基于風險評估的限度與驗證方案。多數(shù)情況下，合理的 CMC 工藝開發(fā)與純化驗證能夠解決大部分雜質(zhì)問題，真正需要投入高成本非臨床毒理學研究的情形相對有限，優(yōu)化工藝、調(diào)整反應條件或驗證清除能力往往更具實際意義。 在實踐層面，盡管 UF/DF 目前仍是純化工藝的主力，我們?nèi)詰_放地關(guān)注并探索替代或補充的分離/清除技術(shù)，以及位點特異性偶聯(lián)等新平臺可能帶來的雜質(zhì)譜變化和控制新思路。對于未來可能擴展的非腫瘤適應癥，可以預見將面臨更嚴格的雜質(zhì)容忍度與致突變性控制要求，需要企業(yè)在早期開發(fā)中保持策略上的靈活性與前瞻性。 把握好“理解產(chǎn)品 — 驗證工藝 — 量化暴露 — 以證據(jù)對接監(jiān)管”的思路，將有助于企業(yè)更有效地支持雜質(zhì)限度的設(shè)定與監(jiān)管溝通，同時避免不必要的重復投入。希望隨著方法學的進步、行業(yè)實踐的積累以及與監(jiān)管的持續(xù)對話，ADC 小分子雜質(zhì)控制能夠從“經(jīng)驗依賴”逐步走向“科學可證”，從而在安全與創(chuàng)新之間找到更加穩(wěn)健的平衡點。
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