背景與核心要求：

疫苗生產(chǎn)場地變更（新建/擴(kuò)建）常伴隨設(shè)備、工藝、物料等關(guān)聯(lián)變更，可能影響疫苗安全性、有效性及質(zhì)量可控性，企業(yè)需依據(jù)相關(guān)指導(dǎo)原則開展嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目杀刃匝芯?，并通過藥品監(jiān)管部門的注冊(cè)現(xiàn)場核查，確保變更后生產(chǎn)連續(xù)可控、疫苗質(zhì)量與變更前可比。

不同類型疫苗的可比性研究要點(diǎn)：

針對(duì)細(xì)菌組分疫苗、病毒疫苗（減毒活/滅活）、重組蛋白疫苗、mRNA 疫苗、含佐劑疫苗的工藝特性，明確了各類型疫苗在培養(yǎng)基一致性、設(shè)備參數(shù)匹配、關(guān)鍵工藝驗(yàn)證、雜質(zhì)控制、佐劑相容性等方面的差異化研究重點(diǎn)。

生產(chǎn)技術(shù)轉(zhuǎn)移對(duì)比報(bào)告核心內(nèi)容：

需包含工藝驗(yàn)證方案設(shè)計(jì)（覆蓋商業(yè)化批次、最差條件）、生產(chǎn)工藝/產(chǎn)品質(zhì)量/穩(wěn)定性數(shù)據(jù)的新舊場地對(duì)比分析，同時(shí)需擴(kuò)展關(guān)鍵質(zhì)量屬性檢測(cè)，確保中間品、原液、制劑質(zhì)量與原場地相當(dāng)。

現(xiàn)場檢查的質(zhì)量管理體系評(píng)估維度：

重點(diǎn)核查人員資質(zhì)與培訓(xùn)、生產(chǎn)場地布局與設(shè)備驗(yàn)證、質(zhì)量控制體系有效性、物料供應(yīng)商與存儲(chǔ)運(yùn)輸管理、計(jì)算機(jī)化系統(tǒng)功能與數(shù)據(jù)完整性，全面保障場地變更后的生產(chǎn)合規(guī)性與疫苗質(zhì)量穩(wěn)定。

摘要

關(guān)鍵詞

對(duì)于疫苗生產(chǎn)場地變更，應(yīng)重點(diǎn)評(píng)估生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備變更、生產(chǎn)規(guī)模變更、工藝變更可能帶來的工藝性能的改變、中間品及終產(chǎn)品質(zhì)量的改變，同時(shí)需要考察關(guān)鍵工序的驗(yàn)證情況（例如細(xì)菌疫苗的殺菌工藝和滅活病毒疫苗的滅活工藝、純化工序的抗原回收率研究、雜質(zhì)去除研究等^[2]。應(yīng)分析各步工藝設(shè)計(jì)的目的，根據(jù)工藝目的對(duì)工藝性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.1 細(xì)菌組分疫苗 

細(xì)菌組分疫苗（bacterial subunit vaccine）生產(chǎn)主要包括細(xì)菌培養(yǎng)、殺菌、收獲、脫毒、純化等工藝步驟。在細(xì)菌組分疫苗生產(chǎn)場地變更時(shí)，生產(chǎn)用培養(yǎng)基的一致性至關(guān)重要。培養(yǎng)基成分的細(xì)微差異，如氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)成分的含量波動(dòng)，pH、滲透壓、均一性等的變化，都可能改變細(xì)菌的生長代謝途徑，進(jìn)而影響疫苗質(zhì)量。不同批次或不同供應(yīng)商的培養(yǎng)基，其質(zhì)量穩(wěn)定性存在一定差異。因此，現(xiàn)場檢查時(shí)要查看新舊場地培養(yǎng)基的采購記錄、廠家質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告、入廠檢驗(yàn)報(bào)告和記錄，對(duì)比成分分析、微生物限度檢查、酸堿度測(cè)定等檢測(cè)數(shù)據(jù)，確保培養(yǎng)基質(zhì)量一致。

生產(chǎn)設(shè)備在細(xì)菌疫苗生產(chǎn)中也起著關(guān)鍵作用。檢查期間應(yīng)對(duì)新舊場地發(fā)酵罐、離心機(jī)等關(guān)鍵設(shè)備的規(guī)格、工作原理及材質(zhì)進(jìn)行詳細(xì)比對(duì)。發(fā)酵罐的攪拌槳葉設(shè)計(jì)、通氣方式、溫度控制精度等可能影響細(xì)菌生長曲線、抗原產(chǎn)量及純度。離心機(jī)的分離效率、離心力、轉(zhuǎn)速等差異，會(huì)影響細(xì)菌菌體的收集效果及后續(xù)工序的純化質(zhì)量。此外，發(fā)酵罐體積增加，收獲液體積隨之增加，應(yīng)檢查下游純化工序中的設(shè)備（如離心機(jī)、粗純和精純等設(shè)備）處理能力是否與上游發(fā)酵產(chǎn)物批量的匹配性?，F(xiàn)場檢查需查看設(shè)備采購合同、安裝調(diào)試記錄、操作規(guī)程，對(duì)比設(shè)備性能參數(shù)測(cè)試報(bào)告，評(píng)估設(shè)備變更對(duì)疫苗生產(chǎn)的影響。

現(xiàn)場檢查時(shí)，還要審查生產(chǎn)記錄、檢驗(yàn)記錄、工藝驗(yàn)證方案和報(bào)告，運(yùn)用統(tǒng)計(jì)分析方法評(píng)估工藝參數(shù)變更對(duì)細(xì)菌形態(tài)、代謝產(chǎn)物及疫苗效力的影響。同時(shí)，應(yīng)對(duì)生產(chǎn)環(huán)境中的潔凈度、微生物負(fù)荷等開展嚴(yán)格檢查，查看環(huán)境監(jiān)測(cè)記錄、環(huán)境監(jiān)測(cè)性能確認(rèn)、清潔消毒操作規(guī)程，確保生產(chǎn)環(huán)境符合要求。

1.2 病毒疫苗

1.2.1 減毒活疫苗 

減毒活疫苗（live attenuated vaccine）一般采用轉(zhuǎn)瓶或細(xì)胞工廠培養(yǎng)，成品多為凍干制劑，且部分減毒活疫苗因無法最終除菌過濾，需全程無菌生產(chǎn)。生產(chǎn)場地變更，需重點(diǎn)關(guān)注疫苗生產(chǎn)用毒株、生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)的代次變更情況，如有代次變更，應(yīng)關(guān)注不同代次的遺傳穩(wěn)定性，并與變更前進(jìn)行比較，必要時(shí)（如在關(guān)鍵位點(diǎn)出現(xiàn)突變）應(yīng)開展免疫原性研究^[3]?，F(xiàn)場檢查要查看細(xì)胞庫/毒種庫管理記錄、基因測(cè)序報(bào)告、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)記錄，分析毒種穩(wěn)定性和免疫原性變化。

關(guān)鍵工序變更，如轉(zhuǎn)瓶工藝變更為細(xì)胞工廠工藝，需要開展全面的質(zhì)量可比性研究^[4]。不僅要對(duì)比收獲液、原液和成品的具體檢測(cè)結(jié)果，還可借助高通量測(cè)序技術(shù)分析病毒基因序列，評(píng)估培養(yǎng)方式的變更是否導(dǎo)致產(chǎn)生新的基因突變，以及上述突變對(duì)疫苗免疫原性和安全性的影響?，F(xiàn)場檢查需查看工藝變更驗(yàn)證方案和報(bào)告、基因測(cè)序原始數(shù)據(jù)。必要時(shí)，應(yīng)對(duì)比新舊場地生產(chǎn)的疫苗在動(dòng)物體內(nèi)的免疫反應(yīng)和毒力表現(xiàn)，評(píng)估變更對(duì)疫苗質(zhì)量的影響。

對(duì)于減毒活疫苗，應(yīng)特別關(guān)注場地變更后灌裝設(shè)備、凍干設(shè)備的性能變化帶來的影響。應(yīng)考察灌裝工藝的均一性，凍干設(shè)備和凍干參數(shù)的變更對(duì)成品質(zhì)量穩(wěn)定性的影響，例如成品病毒滴度是否下降，下降度是否與原場地可比并處于可接受范圍。同時(shí)，要關(guān)注企業(yè)是否對(duì)全程無菌操作的控制策略和污染控制策略進(jìn)行全面的分析，新生產(chǎn)場地的無菌保障水平是否得到保證。

1.2.2 滅活疫苗 

傳統(tǒng)滅活疫苗（inactivated vaccine）的工藝包括病毒培養(yǎng)、濃縮、病毒滅活、純化等工藝步驟。應(yīng)比較變更前后病毒收獲液的病毒滴度、抗原含量、宿主細(xì)胞蛋白殘留（host cell protein residue, HCP residue）及宿主DNA 殘留等，鼓勵(lì)開展連續(xù)收獲過程中上述產(chǎn)品性能指標(biāo)的變化動(dòng)力學(xué)曲線；比較變更前后濃縮液、純化液中的蛋白含量、抗原含量、雜質(zhì)殘留量等，評(píng)估濃縮、純化等工序的抗原回收率和雜質(zhì)去除率。對(duì)于滅活工藝開展評(píng)估，應(yīng)參照《中華人民共和國藥典》2025 版（簡稱《中國藥典》）要求開展連續(xù)5 個(gè)批次的規(guī)?；瘻缁罟に囼?yàn)證，并進(jìn)行滅活動(dòng)力學(xué)曲線研究，評(píng)估滅活工藝的一致性。需對(duì)新舊場地滅活工藝階段的總蛋白含量、滅活劑種類、濃度、滅活時(shí)間和溫度等滅活工藝參數(shù)進(jìn)行比對(duì)。

現(xiàn)場檢查要查看滅活工藝操作規(guī)程、工藝驗(yàn)證方案和報(bào)告，對(duì)比滅活劑采購記錄、質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告，確保滅活工藝穩(wěn)定有效。在抗原純化工藝方面，可根據(jù)工藝放大或參數(shù)變化等因素，有針對(duì)性地關(guān)注變更前后雜質(zhì)去除效果、抗原純度和抗原收率等。

現(xiàn)場檢查需查看純化工藝操作規(guī)程、高效液相色譜法（high-performance liquid chromatography, HPLC）等分析儀器的檢測(cè)記錄，對(duì)比雜質(zhì)檢測(cè)報(bào)告、抗原純度和收率數(shù)據(jù)，評(píng)估純化工藝變更對(duì)疫苗質(zhì)量的影響。此外，要關(guān)注疫苗的穩(wěn)定性，查看中間產(chǎn)物存放時(shí)間變更情況、穩(wěn)定性試驗(yàn)方案、檢測(cè)記錄，對(duì)比新舊場地生產(chǎn)疫苗原液及成品在加速和長期穩(wěn)定性試驗(yàn)中的質(zhì)量變化。

1.3 重組蛋白疫苗

重組蛋白疫苗（recombinant protein vaccine）場地變更時(shí)，其發(fā)酵體系、純化工藝和產(chǎn)品關(guān)鍵質(zhì)量屬性是檢查的關(guān)鍵關(guān)注點(diǎn)。在發(fā)酵體系方面，需對(duì)比新舊場地細(xì)胞培養(yǎng)條件、誘導(dǎo)表達(dá)參數(shù)以及持續(xù)表達(dá)穩(wěn)定性。宿主細(xì)胞培養(yǎng)條件（如培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)溫度、pH、溶氧、攪拌速率等）的變化，可能影響細(xì)胞生長曲線和蛋白表達(dá)量。誘導(dǎo)表達(dá)參數(shù)（如誘導(dǎo)劑濃度、誘導(dǎo)時(shí)間等）的調(diào)整，可能改變蛋白表達(dá)水平和純度?，F(xiàn)場檢查要查看細(xì)胞培養(yǎng)記錄、誘導(dǎo)表達(dá)工藝驗(yàn)證報(bào)告，對(duì)比目的蛋白表達(dá)動(dòng)力學(xué)曲線等檢測(cè)報(bào)告，評(píng)估發(fā)酵系統(tǒng)變更對(duì)疫苗質(zhì)量的影響。

純化工藝的變更，如層析柱填料規(guī)模、種類、洗脫條件等，需對(duì)比變更前后各工藝步驟收獲目的蛋白純度、雜質(zhì)殘留量以及活性?，F(xiàn)場檢查需查看純化工藝操作規(guī)程、HPLC 純度分析等分析儀器的檢測(cè)記錄，對(duì)比蛋白純度、雜質(zhì)殘留量和活性檢測(cè)數(shù)據(jù)，分析純化工藝變更對(duì)疫苗質(zhì)量的影響。

產(chǎn)品質(zhì)量特性方面，除常規(guī)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的放行檢測(cè)項(xiàng)目外，如有必要還需進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量特性研究，如影響蛋白免疫原性的特性（如病毒樣顆粒完整性、多聚物含量等）、蛋白的高級(jí)結(jié)構(gòu)、糖基化修飾等^[5]。

現(xiàn)場檢查要查看相關(guān)檢測(cè)報(bào)告，如電鏡、圓二色譜、質(zhì)譜等檢測(cè)原始圖譜和數(shù)據(jù)，確保變更不影響疫苗的安全性和有效性。

重組蛋白疫苗通常需要添加佐劑，佐劑變更相關(guān)內(nèi)容詳見1.5項(xiàng)。

1.4 mRNA疫苗

mRNA疫苗（messenger RNA vaccine）作為新興疫苗技術(shù)，場地變更可比性研究具有獨(dú)特的關(guān)注點(diǎn)。mRNA的合成、純化以及脂質(zhì)納米顆粒（lipid nanoparticles, LNP）制劑工藝是決定疫苗質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)^[6]。現(xiàn)場檢查要查看核苷酸原料采購記錄、質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告，合成酶活性檢測(cè)報(bào)告，合成工藝操作規(guī)程及驗(yàn)證報(bào)告，確保mRNA疫苗合成工藝的一致性。純化工藝中，對(duì)比雜質(zhì)去除效果，尤其是殘留的宿主細(xì)胞蛋白、雙鏈RNA、未反應(yīng)的核苷酸、酶底物等雜質(zhì)，這些雜質(zhì)可能影響疫苗安全性和有效性?，F(xiàn)場檢查需查看純化工藝操作規(guī)程、雜質(zhì)檢測(cè)報(bào)告，對(duì)比新舊場地雜質(zhì)去除效果，確保純化工藝有效?，F(xiàn)場檢查要查看LNP配方研發(fā)記錄、制備工藝操作規(guī)程及驗(yàn)證報(bào)告，包封率檢測(cè)報(bào)告，分析制劑工藝變更對(duì)mRNA疫苗關(guān)鍵質(zhì)量屬性（如粒徑、完整性、純度等）、批間一致性、遞送效率以及免疫原性的影響。此外，mRNA疫苗對(duì)儲(chǔ)存和運(yùn)輸條件敏感，現(xiàn)場檢查要查看冷鏈管理記錄、溫度監(jiān)控設(shè)備校準(zhǔn)記錄、冷鏈運(yùn)輸驗(yàn)證材料，確保疫苗質(zhì)量在整個(gè)供應(yīng)鏈中不受影響。

1.5 含佐劑疫苗

含佐劑疫苗（adjuvanted vaccine）在場地變更時(shí)，除關(guān)注疫苗抗原本身生產(chǎn)工藝外，需重點(diǎn)關(guān)注佐劑相關(guān)因素，對(duì)比新舊場地佐劑供應(yīng)商、佐劑制備工藝以及半成品配制工藝。佐劑質(zhì)量差異可能影響疫苗免疫效果和安全性^[7]?，F(xiàn)場檢查要查看佐劑采購記錄、質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告，佐劑制備工藝操作規(guī)程及驗(yàn)證報(bào)告，半成品配制工藝記錄，對(duì)比變更前后佐劑對(duì)吸附產(chǎn)物、疫苗成品的影響。若臨床前研究不能證實(shí)佐劑變更未對(duì)疫苗產(chǎn)生不利影響，則需開展橋接臨床研究，現(xiàn)場檢查要查看臨床研究方案、研究報(bào)告。此外，要關(guān)注佐劑與疫苗其他成分的相容性，查看相容性試驗(yàn)報(bào)告，確保在新場地生產(chǎn)的疫苗質(zhì)量穩(wěn)定。

疫苗在擬進(jìn)行生產(chǎn)技術(shù)轉(zhuǎn)移前，應(yīng)對(duì)原生產(chǎn)場地生產(chǎn)的批次進(jìn)行回顧性分析，包括關(guān)鍵臨床批數(shù)據(jù)、上市產(chǎn)品批檢驗(yàn)數(shù)據(jù)及每年的工藝回顧分析數(shù)據(jù)。對(duì)工藝再驗(yàn)證批次進(jìn)行分析，除批檢驗(yàn)項(xiàng)目外，還包括工藝性能分析和擴(kuò)展的檢驗(yàn)項(xiàng)目分析，根據(jù)結(jié)果擬定新生產(chǎn)場地工藝驗(yàn)證中間品、原液、制劑的可接受標(biāo)準(zhǔn)，以及工藝性能評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。

2.1 工藝驗(yàn)證方案設(shè)計(jì) 

驗(yàn)證批次策略：至少連續(xù)3 批商業(yè)化生產(chǎn)批次；涉及病毒滅活、殺菌工藝的，考慮滅活驗(yàn)證的需要，應(yīng)連續(xù)5個(gè)批次。驗(yàn)證批次應(yīng)盡可能覆蓋最差條件（如最低培養(yǎng)溫度、最高離心轉(zhuǎn)速）^[5]。此外，如有多臺(tái)相同工藝步驟使用的相同設(shè)備，應(yīng)在工藝驗(yàn)證策略中予以關(guān)注。

在變更后的生產(chǎn)場地應(yīng)盡可能采用與原場地一致的生產(chǎn)工藝，若涉及工藝流程改變，或工藝參數(shù)范圍的設(shè)定和控制方面的變化，則應(yīng)開展相應(yīng)的研究或驗(yàn)證，包括但不限于工藝或參數(shù)變更的理論基礎(chǔ)、關(guān)鍵質(zhì)量屬性（critical quality attribute, CQA）的對(duì)比研究、關(guān)鍵控制參數(shù)（critical process parameter, CPP）的對(duì)比研究、穩(wěn)定性研究等。工藝驗(yàn)證關(guān)鍵物料應(yīng)盡可能與原場地一致。重點(diǎn)評(píng)價(jià)在新的生產(chǎn)場地，采用新的生產(chǎn)設(shè)備，制備的中間品、原液、制劑與原產(chǎn)地的質(zhì)量是否可比。為此，在工藝驗(yàn)證設(shè)計(jì)中，應(yīng)對(duì)中間品增加檢驗(yàn)項(xiàng)目。以凍干人用狂犬病疫苗的生產(chǎn)場地變更為例，病毒收獲液、病毒濃縮液、病毒純化液均應(yīng)增加蛋白質(zhì)含量、牛血清白蛋白殘留量、宿主細(xì)胞蛋白含量、宿主細(xì)胞DNA殘留、抗原含量的檢測(cè)，并與場地變更前比較；同時(shí)，評(píng)價(jià)新場地新設(shè)備的工藝性能，如超濾濃縮和純化工藝分別對(duì)雜質(zhì)去除率、抗原回收率的影響。另外，還需重點(diǎn)關(guān)注制劑處方抗原投料量是否改變，及同樣劑量對(duì)應(yīng)成品效價(jià)的差異。

2.2 生產(chǎn)工藝數(shù)據(jù)對(duì)比 

對(duì)比生產(chǎn)場地變更前后商業(yè)化批次的生產(chǎn)工藝數(shù)據(jù)，包括原輔料使用情況、關(guān)鍵工藝參數(shù)和生產(chǎn)過程控制數(shù)據(jù)。在原材料方面，現(xiàn)場檢查要查看原材料采購合同、質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告，對(duì)比新舊場地原材料供應(yīng)商、規(guī)格、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并且分析原輔料變更對(duì)疫苗質(zhì)量的潛在影響。關(guān)鍵工藝參數(shù)，如發(fā)酵溫度、純化洗脫條件等，需對(duì)比參數(shù)設(shè)定值和實(shí)際生產(chǎn)過程參數(shù)記錄數(shù)據(jù)。現(xiàn)場檢查要查看生產(chǎn)記錄、工藝驗(yàn)證報(bào)告，運(yùn)用統(tǒng)計(jì)分析方法評(píng)估參數(shù)變化對(duì)疫苗質(zhì)量的影響。檢查關(guān)鍵工藝參數(shù)是否與原場地一致，比較場地變更前后的記錄數(shù)據(jù)，變更后場地的工藝記錄數(shù)據(jù)是否在歷史數(shù)據(jù)的警戒限內(nèi)。生產(chǎn)過程控制數(shù)據(jù)，如微生物限度、中間產(chǎn)物質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果等，通過對(duì)比分析，判斷新場地生產(chǎn)過程控制的有效性和穩(wěn)定性。現(xiàn)場檢查要查看過程控制記錄、檢驗(yàn)報(bào)告，確保生產(chǎn)過程受控。

2.3 產(chǎn)品質(zhì)量數(shù)據(jù)對(duì)比

對(duì)比新舊場地商業(yè)化批次疫苗的質(zhì)量數(shù)據(jù)，涵蓋放行檢測(cè)數(shù)據(jù)和擴(kuò)展質(zhì)量特性數(shù)據(jù)。放行檢測(cè)數(shù)據(jù)包括外觀、純度、活性或效價(jià)、無菌等常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，確保新場地生產(chǎn)疫苗符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。現(xiàn)場檢查要查看質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告，對(duì)比新舊場地放行檢測(cè)數(shù)據(jù)，判斷疫苗質(zhì)量是否相當(dāng)。

對(duì)于重組蛋白類制品，擴(kuò)展質(zhì)量特性數(shù)據(jù)，如蛋白結(jié)構(gòu)、雜質(zhì)譜、免疫原性等，通過多種分析方法進(jìn)行對(duì)比，評(píng)估變更對(duì)疫苗深層次質(zhì)量屬性的影響?，F(xiàn)場檢查要查看相關(guān)檢測(cè)報(bào)告，運(yùn)用圓二色譜、質(zhì)譜、電鏡、核磁分析、動(dòng)物或細(xì)胞實(shí)驗(yàn)等技術(shù)和方法的檢測(cè)數(shù)據(jù)，對(duì)于存在差異的數(shù)據(jù)，深入分析原因，判斷差異是否在可接受范圍內(nèi)，以及是否影響疫苗安全性和有效性^[8]。

2.4 穩(wěn)定性數(shù)據(jù)對(duì)比 

穩(wěn)定性研究是評(píng)估疫苗質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)，一般情況下，藥物的穩(wěn)定性研究主要包括影響因素試驗(yàn)、加速穩(wěn)定性試驗(yàn)和長期穩(wěn)定性試驗(yàn)。需對(duì)比新舊場地商業(yè)化批次疫苗在強(qiáng)制降解、加速和長期穩(wěn)定性試驗(yàn)中的數(shù)據(jù)，包括外觀變化、活性下降程度、雜質(zhì)增長情況等。對(duì)于數(shù)據(jù)對(duì)比分析，建議使用統(tǒng)計(jì)軟件（如JMP）分析新舊場地產(chǎn)品的降解速率差異，設(shè)定等效標(biāo)準(zhǔn)（如效價(jià)下降≤10%）?，F(xiàn)場檢查要查看穩(wěn)定性試驗(yàn)方案、檢測(cè)記錄，對(duì)比新舊場地穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，判斷新場地生產(chǎn)疫苗的穩(wěn)定性是否與舊場地相當(dāng)，評(píng)估疫苗在有效期內(nèi)的質(zhì)量可靠性。若穩(wěn)定性數(shù)據(jù)存在差異，還需進(jìn)一步研究差異原因，并制定相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)控制措施?，F(xiàn)場檢查要查看原因分析報(bào)告、風(fēng)險(xiǎn)控制措施及實(shí)施記錄，確保疫苗的質(zhì)量安全。

良好的質(zhì)量管理體系是變更實(shí)施和風(fēng)險(xiǎn)控制的基礎(chǔ)，現(xiàn)場檢查對(duì)質(zhì)量管理體系評(píng)估包括人員與文件、生產(chǎn)場地、質(zhì)量控制、物料、計(jì)算機(jī)化系統(tǒng)的檢查。

3.1 人員與文件檢查 

現(xiàn)場檢查首先要對(duì)相關(guān)人員進(jìn)行訪談，了解其對(duì)產(chǎn)品知識(shí)的掌握情況。檢查操作人員是否嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行生產(chǎn)，技術(shù)人員對(duì)工藝變更的理解和把控能力，檢驗(yàn)人員對(duì)檢驗(yàn)方法的熟悉情況，質(zhì)量管理人員對(duì)質(zhì)量管理體系的執(zhí)行情況。同時(shí)，全面審查相關(guān)文件，包括生產(chǎn)工藝規(guī)程、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、驗(yàn)證文件、穩(wěn)定性研究報(bào)告、變更管理文件等。檢查文件的完整性、一致性和準(zhǔn)確性，確保文件能夠真實(shí)反映疫苗生產(chǎn)和可比性研究的全過程。如果場地變更中涉及到人員變更，應(yīng)對(duì)人員變更情況進(jìn)行檢查，建議關(guān)注以下幾個(gè)方面。

3.1.1 人員資質(zhì)與經(jīng)驗(yàn)匹配 

關(guān)鍵崗位對(duì)比表：列出新舊場地生產(chǎn)、質(zhì)量、設(shè)備維護(hù)等關(guān)鍵崗位人員，對(duì)比學(xué)歷、專業(yè)背景及從業(yè)年限等，對(duì)從業(yè)人員的專業(yè)背景進(jìn)行比較。技能矩陣分析：評(píng)估新團(tuán)隊(duì)在特定工藝（如病毒滅活、mRNA包封）的技能缺口，企業(yè)是否制定了針對(duì)性培訓(xùn)計(jì)劃。

3.1.2 培訓(xùn)體系與效果確認(rèn)

 ① 基礎(chǔ)培訓(xùn)：包括但不限于藥事法規(guī)、設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（standard operating procedure, SOP）、偏差處理、超標(biāo)結(jié)果（out of specification, OOS）調(diào)查處理、糾正和預(yù)防措施（corrective and preventive action, CAPA）等流程。 ② 專項(xiàng)培訓(xùn)：新的設(shè)備與儀器操作培訓(xùn)，崗位操作配合。③ 考核方式：理論考試——覆蓋工藝和檢測(cè)原理、工藝和檢測(cè)控制要點(diǎn)等；實(shí)操考核——模擬生產(chǎn)場景，對(duì)擬上崗的員工進(jìn)行實(shí)操考核，由資深人員進(jìn)行評(píng)價(jià)，確認(rèn)員工上崗前能達(dá)到崗位操作評(píng)分要求。

3.1.3 知識(shí)轉(zhuǎn)移的管理 

技術(shù)交接記錄：檢查新舊場地技術(shù)轉(zhuǎn)移范圍，包括質(zhì)量管理體系、細(xì)胞和/或菌毒種、生產(chǎn)工藝、分析方法、原輔材料等；檢查技術(shù)轉(zhuǎn)移文件，如工藝開發(fā)報(bào)告、工藝驗(yàn)證方案與報(bào)告、工藝參數(shù)優(yōu)化記錄、批生產(chǎn)和檢驗(yàn)記錄、穩(wěn)定性考察記錄、檢驗(yàn)方法開發(fā)報(bào)告、偏差處理案例庫、變更記錄等，確認(rèn)新團(tuán)隊(duì)是否簽署確認(rèn)回執(zhí)。

定期能力復(fù)核：通過年度技能評(píng)估（如盲樣檢測(cè)、模擬生產(chǎn)），確保人員能力持續(xù)符合要求。

3.2 生產(chǎn)場地檢查

3.2.1 設(shè)備差異的全面評(píng)估與驗(yàn)證 

深入生產(chǎn)現(xiàn)場，檢查生產(chǎn)設(shè)備的運(yùn)行狀態(tài)，觀察設(shè)備是否正常運(yùn)行，有無故障報(bào)警。檢查設(shè)備的清潔和維護(hù)記錄，確保設(shè)備符合生產(chǎn)要求。查看生產(chǎn)車間的布局是否合理，人流、物流是否分開，避免交叉污染。檢查潔凈區(qū)的潔凈度、溫濕度、壓差等環(huán)境參數(shù)是否符合規(guī)定，環(huán)境監(jiān)測(cè)設(shè)備是否正常運(yùn)行且定期校準(zhǔn)。設(shè)備差異評(píng)估至少應(yīng)包括以下兩方面：① 關(guān)鍵設(shè)備清單。明確新舊場地涉及的所有關(guān)鍵設(shè)備（如發(fā)酵罐、純化層析系統(tǒng)、灌裝線、凍干機(jī)、滅活設(shè)備等），列出設(shè)備名稱、型號(hào)、制造商及技術(shù)原理。原理差異分析：若舊場地使用固定床層析柱，新場地改用流穿式層析柱，需評(píng)估其對(duì)載量、流速及雜質(zhì)去除效率的影響。對(duì)于mRNA 疫苗合成設(shè)備，若舊場地采用化學(xué)合成法，新場地采用酶促合成法，需驗(yàn)證合成效率及產(chǎn)物純度的一致性。技術(shù)文件審查：檢查設(shè)備技術(shù)規(guī)格書、驗(yàn)證與確認(rèn)，包括設(shè)計(jì)確認(rèn)（design qualification, DQ）、安裝確認(rèn)（installation qualification, IQ）、運(yùn)行確認(rèn)（operational qualification, OQ）、性能確認(rèn)（performance qualification, PQ）等報(bào)告，確認(rèn)新設(shè)備是否滿足工藝需求（如溫度控制精度±0.5 ℃、壓力波動(dòng)范圍等）。產(chǎn)能差異與工藝放大驗(yàn)證：如產(chǎn)能放大的效應(yīng)評(píng)估時(shí)，若發(fā)酵罐體積從500 L 擴(kuò)大至2 000 L，需通過縮小模型（scale-down model）驗(yàn)證關(guān)鍵參數(shù)（如溶氧速率、混合時(shí)間）的等效性^[9]。檢查工藝驗(yàn)證批次數(shù)據(jù)（至少3 批），分析批間差異（如抗原收率波動(dòng)是否≤5%）。PQ 方面，如新離心機(jī)的分離效率需通過實(shí)際生產(chǎn)批次驗(yàn)證，確保菌體收獲率≥95%。檢查設(shè)備運(yùn)行日志，確認(rèn)故障率（如停機(jī)次數(shù)/月）是否在可接受范圍內(nèi)。② 維護(hù)保養(yǎng)與校準(zhǔn)。維護(hù)保養(yǎng)計(jì)劃對(duì)比：審查新舊場地設(shè)備的預(yù)防性維護(hù)計(jì)劃（如潤滑周期、關(guān)鍵部件更換頻率），確保新設(shè)備維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)不低于原場地。校準(zhǔn)追溯性：檢查關(guān)鍵儀表（如pH 探頭、溫度傳感器）的校準(zhǔn)證書，確認(rèn)校準(zhǔn)周期是否符合校驗(yàn)管理文件的要求（如每六個(gè)月1 次），并對(duì)比新舊場地校準(zhǔn)結(jié)果的偏差。

3.2.2 對(duì)比新舊場地生產(chǎn)設(shè)施的差異分析 

核心圍繞布局合理性、環(huán)境控制達(dá)標(biāo)性及設(shè)備驗(yàn)證完整性展開。布局上，對(duì)比新舊場地人流物流分離、區(qū)域隔離設(shè)計(jì)，評(píng)估新場地是否優(yōu)化交叉污染防控。環(huán)境控制方面，對(duì)照疫苗生產(chǎn)潔凈度、溫濕度標(biāo)準(zhǔn)，核查新舊場地環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)、空調(diào)凈化與水系統(tǒng)運(yùn)行維護(hù)記錄的差異。設(shè)備與設(shè)施上，重點(diǎn)比對(duì)新場地驗(yàn)證報(bào)告與舊場地合規(guī)數(shù)據(jù)，確認(rèn)新場地 IQ/OQ/PQ 驗(yàn)證是否全覆蓋，確保其在硬件配置、運(yùn)行穩(wěn)定性上滿足疫苗生產(chǎn)要求，且整體質(zhì)量保障能力不低于舊場地。

3.2.3 生產(chǎn)車間工藝布局的分析 

潔凈區(qū)設(shè)計(jì)與風(fēng)險(xiǎn)控制主要包括：① 潔凈級(jí)別對(duì)比：舊場地原液制備區(qū)為C級(jí)，新場地升級(jí)為B級(jí)，需評(píng)估升級(jí)對(duì)產(chǎn)品暴露風(fēng)險(xiǎn)的影響（如環(huán)境微生物負(fù)荷降低是否顯著）。檢查環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)（懸浮粒子、沉降菌、浮游菌、表面微生物），確保新場地?cái)?shù)據(jù)符合相應(yīng)潔凈度標(biāo)準(zhǔn)。② 壓差梯度驗(yàn)證：確認(rèn)關(guān)鍵區(qū)域（如病毒滅活區(qū)與灌裝區(qū)）的壓差梯度≥10 Pa，相同潔凈等級(jí)但不同用途有一定壓差梯度，并審查壓差監(jiān)測(cè)記錄（如每小時(shí)自動(dòng)記錄）。

3.2.4 人流與物流的優(yōu)化管理

單向流設(shè)計(jì)：檢查新場地是否采用單向人流（更衣→洗手→緩沖→生產(chǎn)區(qū)）和物流（原材料入口→中間品暫存→成品出口）路徑，避免交叉污染。通過煙霧試驗(yàn)或氣流可視化報(bào)告，驗(yàn)證氣流方向是否符合設(shè)計(jì)要求。交叉污染風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估：例如，若新場地同時(shí)生產(chǎn)含佐劑疫苗和非佐劑疫苗，需審查隔離措施（如專用生產(chǎn)線或分時(shí)段生產(chǎn)）的有效性。

3.2.5 設(shè)備布局對(duì)工藝的影響 

距離與時(shí)間控制：若原液區(qū)與制劑的距離延長，需驗(yàn)證中間產(chǎn)物或原液暫存和轉(zhuǎn)運(yùn)的時(shí)間是否超出工藝限定范圍（如≤4 h）。檢查冷鏈轉(zhuǎn)運(yùn)記錄（如溫度記錄儀數(shù)據(jù)）、轉(zhuǎn)運(yùn)驗(yàn)證方案和報(bào)告、原液保存時(shí)限驗(yàn)證材料，確保中間品在運(yùn)輸條件的質(zhì)量穩(wěn)定。

3.3 質(zhì)量控制檢查 

檢查質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備是否齊全、運(yùn)行是否正常，儀器設(shè)備是否定期校準(zhǔn)和維護(hù)。查看質(zhì)量檢驗(yàn)人員的操作是否規(guī)范，檢驗(yàn)記錄是否完整、準(zhǔn)確。對(duì)疫苗的中間產(chǎn)品、成品進(jìn)行抽樣檢查，對(duì)比新舊場地產(chǎn)品的質(zhì)量數(shù)據(jù)，評(píng)估產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性和一致性。檢查質(zhì)量控制體系的運(yùn)行情況，包括偏差處理、OOS/OOT/MDD管理、標(biāo)準(zhǔn)品管理、取樣與留樣管理等，確保質(zhì)量控制有效。

3.3.1 質(zhì)量對(duì)比研究的科學(xué)化實(shí)施 

需進(jìn)行放行標(biāo)準(zhǔn)的一致性評(píng)估。統(tǒng)計(jì)方法應(yīng)用：使用等效性檢驗(yàn)（如單/雙側(cè)t檢驗(yàn)，等效區(qū)間±5%）對(duì)比新舊場地原液的純度、活性數(shù)據(jù)。檢查數(shù)據(jù)分布（如正態(tài)性檢驗(yàn)），排除異常值影響。

3.3.2 結(jié)構(gòu)表征的精細(xì)化分析

對(duì)于mRNA疫苗，應(yīng)關(guān)注用于純度和序列完整性的毛細(xì)管電泳（capillary electrophoresis, CE）分析，關(guān)注驗(yàn)證5'帽結(jié)構(gòu)和Poly-A尾完整性的質(zhì)譜或色譜方法，以及用于LNP質(zhì)量控制的電鏡、包封率等分析^[10]。

3.4 物料檢查 

疫苗生產(chǎn)場地變更若涉及物料（如原材料、輔料、包裝材料等）的調(diào)整，需重點(diǎn)關(guān)注變更的合理性、質(zhì)量一致性以及對(duì)疫苗安全性和有效性的潛在影響?，F(xiàn)場檢查應(yīng)基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估原則，結(jié)合《已上市疫苗藥學(xué)變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則》中物料變更的分類（重大、中等、微?。┘凹夹g(shù)要求，重點(diǎn)核查以下內(nèi)容。

3.4.1 關(guān)鍵物料的一致性評(píng)估 

供應(yīng)商與來源對(duì)比：檢查新舊場地物料供應(yīng)商的資質(zhì)文件（如GMP證書、審計(jì)報(bào)告）、采購合同及質(zhì)量協(xié)議，確保供應(yīng)商變更符合注冊(cè)要求。對(duì)比關(guān)鍵物料（如細(xì)胞基質(zhì)、菌/毒種、培養(yǎng)基）的來源信息（如動(dòng)物源性物料的非疫區(qū)證明、重組蛋白的宿主細(xì)胞來源）。若涉及動(dòng)物源性物料（如牛血清），需核查其傳染性海綿狀腦?。╰ransmissible spongiform encephalopathy, TSE）/牛海綿狀腦?。╞ovine spongiform encephalopathy, BSE）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告、無動(dòng)物源聲明及替代策略（如是否采用無血清培養(yǎng)基）。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢驗(yàn)數(shù)據(jù)：審查新舊場地物料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（如純度、微生物限度、內(nèi)毒素）及檢驗(yàn)報(bào)告，分析變更后物料是否滿足原批準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)或更嚴(yán)格的要求。重點(diǎn)核查佐劑、滅活劑等關(guān)鍵物料的理化特性（如鋁佐劑的顆粒大小、吸附效率）及生物安全性（如殘留雜質(zhì)）。對(duì)于基因工程疫苗的質(zhì)粒、mRNA疫苗的核苷酸原料，需比對(duì)序列一致性及雜質(zhì)譜（如雙鏈RNA殘留）。變更支持性研究：若物料變更屬于重大或中等類別，需檢查可比性研究數(shù)據(jù)，包括在工藝驗(yàn)證批次敏感階段、原液及成品階段開展充分的質(zhì)量對(duì)比（如抗原收率、雜質(zhì)去除率）分析。開展穩(wěn)定性可比性研究數(shù)據(jù)（加速和長期），評(píng)估物料變更對(duì)疫苗效價(jià)、降解產(chǎn)物的影響。存儲(chǔ)與運(yùn)輸管理：核查物料存儲(chǔ)條件（如溫度、濕度、避光要求）是否與原場地一致，查看溫濕度監(jiān)控記錄及偏差處理報(bào)告。檢查冷鏈運(yùn)輸驗(yàn)證報(bào)告（如運(yùn)輸時(shí)間、溫度波動(dòng)范圍），確保物料在運(yùn)輸過程中質(zhì)量穩(wěn)定。

3.5 計(jì)算機(jī)化系統(tǒng)檢查 

計(jì)算機(jī)化系統(tǒng)在疫苗生產(chǎn)中涵蓋工藝控制、數(shù)據(jù)采集、質(zhì)量檢驗(yàn)等關(guān)鍵環(huán)節(jié)。場地變更若涉及系統(tǒng)升級(jí)、軟件替換或硬件調(diào)整，需依據(jù)《已上市疫苗藥學(xué)變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則》、國際人用藥品注冊(cè)技術(shù)協(xié)調(diào)會(huì)（ International Council for Harmonization of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use, ICH）制定的《原料藥的藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范指南》、國際制藥工程協(xié)會(huì)（International Society For Pharmaceutical Engineering, ISPE）《良好自動(dòng)化生產(chǎn)實(shí)踐指南（第5 版）》及《聯(lián)邦法規(guī)》第21 篇第1 章A 分章第11 部分等要求^[11]，重點(diǎn)核查以下內(nèi)容。

3.5.1 系統(tǒng)功能與驗(yàn)證 

① 系統(tǒng)一致性評(píng)估：對(duì)比新舊場地計(jì)算機(jī)化系統(tǒng)的功能模塊（如發(fā)酵罐控制系統(tǒng)、純化層析軟件、環(huán)境監(jiān)測(cè)系統(tǒng)），確保關(guān)鍵功能（如參數(shù)設(shè)定、數(shù)據(jù)采集、報(bào)警邏輯）未發(fā)生實(shí)質(zhì)性改變。檢查系統(tǒng)變更后的驗(yàn)證文件（如DQ/IQ/OQ/PQ報(bào)告），確認(rèn)新系統(tǒng)符合用戶需求規(guī)格（user requirements specification, URS）及生產(chǎn)工藝要求。② 數(shù)據(jù)完整性與安全性。審計(jì)追蹤功能：檢查系統(tǒng)是否啟用審計(jì)追蹤功能，確保所有操作（如參數(shù)修改、數(shù)據(jù)刪除）可追溯。權(quán)限管理：核查用戶權(quán)限分級(jí)設(shè)置（如操作員、管理員、QA），確保關(guān)鍵參數(shù)修改需經(jīng)授權(quán)及雙人復(fù)核。數(shù)據(jù)備份與恢復(fù)：檢查數(shù)據(jù)備份策略（如本地/云端存儲(chǔ)）、備份頻率及恢復(fù)測(cè)試記錄，防止數(shù)據(jù)丟失。③ 接口與集成驗(yàn)證：若新場地引入自動(dòng)化設(shè)備（如灌裝線、凍干機(jī)），需驗(yàn)證其與中央控制系統(tǒng)的接口兼容性，確保數(shù)據(jù)無縫傳輸。檢查實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)（LIMS）與生產(chǎn)系統(tǒng)的數(shù)據(jù)交互，確保檢驗(yàn)結(jié)果自動(dòng)錄入且不可篡改。備份管理是數(shù)據(jù)完整性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，需檢查計(jì)算機(jī)化系統(tǒng)的災(zāi)害恢復(fù)確認(rèn)/驗(yàn)證，以及備份的連續(xù)性和完整性。

3.5.2 系統(tǒng)變更影響分析 

工藝控制參數(shù)：對(duì)比新舊系統(tǒng)記錄的工藝參數(shù)（如發(fā)酵溫度、滅活時(shí)間），分析變更后系統(tǒng)是否導(dǎo)致參數(shù)漂移或超限。檢查報(bào)警閾值設(shè)置是否合理，查看歷史報(bào)警記錄及處理措施。CQA監(jiān)控：審查系統(tǒng)是否具備實(shí)時(shí)監(jiān)控CQA的功能（如在線pH檢測(cè)、病毒滴度分析），并驗(yàn)證其檢測(cè)精度與原系統(tǒng)一致。對(duì)于mRNA疫苗的合成設(shè)備，檢查核苷酸投料量、反應(yīng)時(shí)間等參數(shù)的閉環(huán)控制邏輯。

3.5.3 計(jì)算機(jī)化系統(tǒng)合規(guī)性檢查 

法規(guī)符合性：核查系統(tǒng)是否符合電子記錄與電子簽名（electronic signature）要求，如美國食品藥品監(jiān)督管理局于1997年頒布的關(guān)于電子記錄和電子簽名的法規(guī)，全稱為《聯(lián)邦法規(guī)》第21篇第1章A分章第11部分，確保數(shù)據(jù)真實(shí)、完整；檢查系統(tǒng)供應(yīng)商的資質(zhì)文件（如ISO認(rèn)證）、軟件版本更新記錄及漏洞修復(fù)報(bào)告。應(yīng)急預(yù)案：審查系統(tǒng)故障應(yīng)急預(yù)案（如備用電源、手動(dòng)操作程序），查看最近一次演練記錄及改進(jìn)措施。